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其他方法試劑盒

丁酸(butyric acid)ELISA試劑盒-競爭法檢測
上海恒遠生物從事酶聯(lián)免疫學(xué)12年有余,技術(shù)成熟,產(chǎn)品穩(wěn)定。恒遠品牌自主研發(fā)ELISA試劑盒,現(xiàn)已涵蓋20多個種屬,數(shù)千種產(chǎn)品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領(lǐng)域。其ELISA試劑盒不僅檢測指標(biāo)豐富,還可以根據(jù)實驗需求定制檢測范圍,并且提供實驗外包與免費代測服務(wù)。歡迎您來電咨詢。
中文名稱 丁酸(butyric acid)ELISA試劑盒-競爭法檢測
規(guī)格 96T
貨號

HB142-SH

價格 ¥2500
種屬
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等
檢測范圍 詳見說明書
靈敏度 詳見說明書
反應(yīng)時間 1-5h
樣本體積 10ul
檢測波長 450nm
貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取
文獻 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取

使用目的:本試劑盒用于測定樣本中丁酸(butyric acid)的含量。




實驗原理


本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測定標(biāo)本中丁酸(butyric acid)水平。用純化的丁酸(butyric acid)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入丁酸(butyric acid),和HRP標(biāo)記的丁酸(butyric acid)抗原,使它們競爭結(jié)合,,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的丁酸(butyric acid)的含量呈負相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中丁酸(butyric acid)的含量。  





操作步驟




1. 加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


2. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。


3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。  


4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。


8. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。




計算


 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。


注意事項


1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。


2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。


3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。


4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。


5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。


6.底物請避光保存。


7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).


8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。


9.本試劑不同批號組分不得混用。


檢測范圍:100 ng/L -5000ng/L


保存條件及有效期


1.試劑盒保存:2-8℃。


2.有效期:6個月





在線詢價

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