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人源細(xì)胞
- 293T/17人胚腎細(xì)胞
- 恒遠(yuǎn)生物致力于建設(shè)國(guó)內(nèi)最大、種類最全的細(xì)胞與微生物標(biāo)準(zhǔn)制品資源庫(kù)，為大學(xué)、科研機(jī)構(gòu)及生物醫(yī)藥研發(fā)企業(yè)提供高質(zhì)量、可回溯、品控可靠的生物制品。主要包括原代細(xì)胞及通用細(xì)胞株、細(xì)胞培養(yǎng)周邊試劑、微生物標(biāo)準(zhǔn)品等產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、儲(chǔ)存和銷售。歡迎來(lái)電咨詢！
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品牌 |
恒遠(yuǎn)生物 |
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貨號(hào) |
HYCC10416 |
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中文名稱 |
293T/17人胚腎細(xì)胞 |
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英文名稱 |
293T/17 |
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規(guī)格 |
T25 |
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價(jià)格 |
1550 |
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形態(tài)特性 |
上皮樣 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
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特征特性 |
293T/17細(xì)胞株是293T (293tsA1609neo)細(xì)胞株的衍生株。 293T 是293細(xì)胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。 293T細(xì)胞進(jìn)行克隆，檢測(cè)pBND和pZAP載體，得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株，293T/17。 細(xì)胞持續(xù)表達(dá)猿病毒40(SV40)大T抗原，而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號(hào)克隆。 293T/17細(xì)胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2載體轉(zhuǎn)染得到ANJOU 65 (見(jiàn) ATCC CRL-11269)細(xì)胞株。 ANJOU 65細(xì)胞再用pCRIPgag-2 和 pGPT2E載體轉(zhuǎn)染得到親宅性外殼表達(dá)細(xì)胞株BOSC 23 (見(jiàn) ATCC CRL-11270)。ANJOU 65細(xì)胞用攜帶gpt抗性基因的pCRIPAMgag載體轉(zhuǎn)染得到Bing (見(jiàn) ATCC CRL-11554) 雙向性表達(dá)包裝細(xì)胞株。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。 在本庫(kù)通過(guò)STR檢測(cè)。 |
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培養(yǎng)條件 |
DMEM(高糖)+10%FBS |
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傳代方法 |
1:3傳代；2~3天1次。 |
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凍存條件 |
無(wú)血清細(xì)胞凍存液 |
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STR |
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特別說(shuō)明 |
本庫(kù)的細(xì)胞系（株）僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的。使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞系（株）轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
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說(shuō)明書(shū) |
咨詢業(yè)務(wù)員獲取 |
細(xì)胞收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)某Ｒ?jiàn)辦法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
若是5%CO2的培養(yǎng)箱，可用密封培養(yǎng)瓶，擰緊瓶蓋后放入5%CO2培養(yǎng)箱，48H內(nèi)要換液一次
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
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