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生化試劑盒

游離膽固醇(FC)含量試劑盒-微量法
恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛,涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優(yōu)良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質的服務。

中文名稱

游離膽固醇(FC)含量試劑盒-微量法 

規(guī)格 96樣
貨號

L-743-SH

價格 ¥350
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法

微量法

貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業(yè)務員獲取
文獻 咨詢我司業(yè)務員獲取

    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

FC是構成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸維生素D生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。

 

測定原理:

FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。

 

自備儀器和用品:

水浴鍋、可調式移液槍、酶標儀、96孔板、異丙醇和蒸餾水。

 

試劑組成和配置:

試劑一:異丙醇100mL(自備);

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑三粉劑×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體40μL×1瓶,4℃保存;

TC標準品:液體1mL×1支,0.5μmol/mL,4℃保存。

 

FC的提取:

1. 組織:按照組織質量(g)試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4離心10min,取上清置冰上待測。

2.細菌、真菌:先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內,棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s,即FC待測液。

3.血清(漿)樣品:直接測定。

 

 

測定操作:

1. 酶標儀預熱30 min,調節(jié)波長到500 nm。

2. FC工作液的配制:臨用前,吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中,充分溶解后再全部轉移回試劑二瓶中,充分混勻,FC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

3. 標準管:依次在96孔板中加入20μL FC標準液和180μL FC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A標準管。

4. 測定管:依次在96孔板中加入20μL FC待測液和180μL FC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定A測定管。

5、空白管:依次在96孔板中加入20μL 試劑一180μL FC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定

A測定管。

 

注意事項:

1、 標準管和空白管只要做一管。

2、 若測定管產生白色渾濁,可以將待測液用異丙醇稀釋2~5倍后測定,并在最后結果乘以相應倍數(shù)。

 

計算公式:

1. 血清(漿)FC含量計算:

FC含量(μmol /dL= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)×100mL

=50×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

C標準液:0.5μmol/mL;100 mL1dL=100 mL。

2. 組織FC含量計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算

FC含量(μmol / mg prot= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

                       = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

FC含量(μmol / g 鮮重= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

                  = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

C標準液:0.5μmol/mL;Cpr樣本蛋白濃度mg/mL;W:樣本質量,g/mL

3. 細胞、細菌中FC含量計算:

FC含量(μmol /104 cell= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

=0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

C標準液:0.5μmol/mL。

最低檢出限為1nmol/mL。



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