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生化試劑盒
- 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
- 恒遠(yuǎn)生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無(wú)機(jī)鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測(cè)樣本類型豐富，涉及多種體液、組織、細(xì)胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測(cè)儀器為酶標(biāo)儀，分光光度計(jì)和熒光酶標(biāo)儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測(cè)服務(wù)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格，所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)
| 中文名稱 |
超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 |
| 規(guī)格 | 96樣 |
| 貨號(hào) |
A-001-SH |
| 價(jià)格 | ￥700 |
| 樣本類型 | 血清，血漿，組織勻漿，細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等 |
| 檢測(cè)范圍 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 檢測(cè)方法 |
微板法 |
| 貨期 | 3-5天 |
| 說(shuō)明書(shū) | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
| 文獻(xiàn) | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
SOD（EC 1.15.1.1）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成 H2O2 和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。
測(cè)定原理：
通過(guò)黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜，后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應(yīng)液藍(lán)色越深，說(shuō)明 SOD 活性愈低，反之活性越高。
需自備的儀器和用品：
酶標(biāo)儀、離心機(jī)、移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 560nm。
2、 將試劑二用蒸餾水稀釋兩倍，用多少配多少。（試劑二和蒸餾水 1：1 稀釋）
3、 將一瓶試劑四用 5mL 蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完），再用蒸餾水稀釋 4 倍，用多少配多少（試劑四和蒸餾水 1：3 稀釋）。
4、 測(cè)定前將試劑一、三和四在 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其他物種）水浴 5min 以上。
5、樣本測(cè)定（在 EP 管或 96 孔板中依次加入下列試劑）
|
試劑名稱（μL） |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
|
試劑一 |
45 |
45 |
|
試劑二 |
2 |
2 |
|
樣本 |
18 |
|
|
蒸餾水 |
|
18 |
|
試劑三 |
35 |
35 |
|
試劑四 |
100 |
100 |
充分混勻，室溫靜置 30min 后，560nm 處測(cè)定各管吸光值 A。
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1，建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用（10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水）。
4、SOD 為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是
（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；
（2) 沒(méi)有按順序加試劑；
（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間 30min 可以延長(zhǎng)到 40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10 倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
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